一、实验目的与要求
通过实验，学习纤维的纵向制片，用 Y172 型哈氏切片器制作纤维断面，了解普通生物显微镜的构造并掌握正确使用方法。
二、实验仪器与用具
生物显微镜，Y172 型哈氏切片器，刀片，火棉胶，甘油，擦镜纸，载玻片，盖玻片。
三、试样
纤维若干
四、实验方法与程序
（1） 纤维纵向制片
取试样一束，以手扯法整理平直，用右手拇指与食指夹取纤维约 20～30 根，按在载玻片上，用左手覆上盖玻片，这样使夹取的纤维平直地按在载玻片上。然后，在盖玻片的两端涂上胶水，使盖玻片粘着并增加视野的清晰度。
（2） 纤维断面切片制作
哈氏切片器结构如图 3—1 所示，它主要有两块金属底板，左底板上有凸舌，右底板上有凹槽，两块底板啮合时，凸舌和凹槽之间留有一定大小的空隙，试样就放在空隙中。空隙的正上方，有与空隙大小相一致的小推杆，用精密螺丝控制推杆的位置。切片时，转动精密螺丝，推杆将纤维从底板的另一面推出，推出的距离（即切片的厚度）由精密螺丝控制。
用哈氏切片器制作纤维断面切片时的操作步骤如下：
1.取哈氏切片器，旋松定位螺丝，并取去定位销，将螺座转到与右底板成垂直的定位（或取下），将左底板从右底板上抽出。
图 3—1 Y172 型纤维切片器
1—金属板（凸槽） 2—金属板（凹槽） 3—精密螺丝
4—螺丝 5—销子 6—螺座
2．取一束试样纤维，用手扯法整理平直，把一定量的纤维放入左底板的凹槽中，将右底板插入，压紧纤维，放入的纤维数量以轻拉纤维束时稍有移动为宜。
3．用锋利的切片切去露在底板正、反两面外边的纤维。
4．转动螺座恢复到原来位置，用定位销加以固定，然后旋紧定位螺丝。此时，精密螺丝下端的推杆应对放入凹槽中的纤维束的上方。
5．旋转精密螺丝，使纤维束稍稍伸出金属底板表面，然后在露出的纤维束上涂上一层薄薄的火棉胶。
6．待火棉胶凝固后，用锋利刀片沿金属底板表面切下第一片切片。在切片时，刀片应尽可能平靠金属底板（即刀片和金属底板间夹角要小），并保持两者间夹角不变。由于第一片切片厚度无法控制，一般舍去不用。从第二片开始作正式试样切片，切片厚度可由精密螺丝控制（大概旋转精密螺丝刻度上的一格左右）。用精密螺丝推出试样，涂上火棉胶，进行火棉胶，进行切片，选择好的切片作为正式试样。
7．把切片放在滴有甘油的载玻片上，盖上盖玻片，在载玻片左角上贴上试样名称标记，然后放在显微镜下观察。
注 1 切片制作时，羊毛切取较为方便，细的其他纤维切取较为困难，因此，可反其他纤维包在羊毛纤维内进行切片，这样容易得到好的切片。
注 2 制作切片时，原则上纤维厚度应小于或等于横向尺寸（纤维直径或宽度），以免纤维倒伏，在显微镜下观察到的是一小段一小段的纤维纵向形态。
（3） 显微镜观察
显微镜结构如图 3—2 所示
图 3—2 显微镜结构图
1—底座 2—镜臂 3—粗调装置 4—镜筒 5—载物台 6—集光器 7—目镜 8—物镜
9—物镜转换器 10—微调装置 11—移动装置 12—光阑
显微镜的结构如图 3—2 所示，它主要由底座、镜筒、目镜、物镜、载物台、光阑、集光器、调焦机构等组成。显微镜的总放大倍数等于物镜放大倍数与目镜放大倍数的乘积（物镜、目镜的放大倍数都标于镜头侧面）。
用显微镜观察纤维时的操作步骤如下：
1.将显微镜面对北光，扳动镜臂，使其适当倾斜（老式显微镜无法调节），以适应自己能较舒适地坐着观察。
2.将适当倍数的目镜放在镜筒上，再将低倍物镜转至镜筒中心线上，以便调焦。
3.将集光器升至最高位置，并开启光阑至最大，用一目自目镜向下观察，调节反光镜，使整个视野呈一最强而均匀的光度为止。
4.除去目镜，观察物镜后透镜，调节反光镜的集光器中心，使在物镜后透镜处光线均匀明亮，再调节光阑 ，使明亮光阑与物镜后透镜大小相一致或稍小些。
5.装上目镜，用粗调装置将镜筒稍许升高，将试样放在载物台上机械移动装置内。
6.再旋转粗调节装置，将物镜下移至最低位置，即物镜尽量接近盖玻片，但注意务必不能使物镜触及盖玻片。这时，操作者眼睛一定霜注视物镜下移，以免损坏镜头。
7.移动载物台上的机械移动装置，即调节前后、左右两个旋钮，使试样移在物镜中心。
8.自目镜下视，用粗调装置慢慢升起镜筒，至见到试样时立即停止。如不能见到试样，则反复进行第 6、7、8步骤。
9.见到试样后，再调节微调装置，使试样成像清晰。
10.如需采用高倍物镜（一般纤维纵向只需用低倍物镜观察，纤维断面形态可用高倍的物镜观察），则按上述方法先用低倍物镜调节，得到清晰的成像后，在不改变镜筒位置情况下，转动物镜转换器，使高倍物镜代替低倍物镜，然后自目镜观察。如成像不够清晰，只要稍稍旋转微调装置，即能得到清晰的物像。如果换成高倍物镜后，视野中不见物像，则需稍微移动机械移动装置，就可找到物像。
11.显微镜调节完毕后，将所制得的纵面及断面制片逐一放在载物台移动尺内，在目镜中观察各种纤维的纵、横断面形态。
12.试验完毕，用擦镜纸交显微镜擦干净。
五、实验报告要求
描绘纤维的纵、横断面形态。
